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竹荪菌种组织分离培养法技术详解

作者 :竹荪之家 发布时间 : 2019-02-25 00:02:04

竹荪菌种的组织分离培养法就是把竹荪组织中的菌丝以及野生竹荪生长的基物上的纯菌丝分离出来进行纯培养,组织分离培养从生物学的角度来看是一种无性繁殖,这如同栽柳树可用被条扦插一样。竹荪的组织分离是将双核菌丝分离出来纯培养,双核菌丝中的两个核并没有融合,即双亲的染色体并没有发生重组,因此组织细胞没有孢子细胞那样具有丰富的遗传变异性。由于组织细胞是双核细胞,因此它们也都能生育结实,而不象孢子细胞那样需要经过一个配对过程。

竹荪菌种组织分离培养法技术详解

竹荪菌种组织分离培养法技术详解

组织分离培养法铰孢子分离培养法需要的设备少,操作简便,取材广泛,容易掌握。但是,同样要求在无菌条件下操作。采用上法的竹荪蛋,或刚开裙的菌柄以及野生竹荪菌丝生长在地下,质地较硬的树根和二端竹节完整的竹子,先用清水冲洗,再用纱布吸干表面水分,最后用75%酒精棉球消毒分离物的表面,在无菌室或无菌箱、无菌帐、超净台,或用5%来荪尔喷雾消毒的一般桌子上铺消毒纱布或毛巾,上放消毒刀、接种针、铲子等,迅速用手术刀将待分离的菌蛋纵制;将待分离的菌柄表面切除;或将待分离的基物削去表皮,将内部未暴路空中的组织切成绿豆大小,用接种针在酒精灯上方迅速放入母种斜面培养基中部,置22℃恒温箱培养,待菌丝长满斜面,组织分离的母种就培养成功。将其放入4~5℃冰箱作为第一代母种备用。这时要合理使用菌种,斜面菌种的频繁转接繁殖使菌种常处于代谢旺盛状态,于是增加变异机会,移代次数越多菌种衰退的可能性就越大。因此,对菌种必须合理使用,严格控制移植代数,保藏菌种以移植不超过2~3代的为宜,生严菌种最多不超过10代。

控制传代次数的做法是:将驯化出来的和外地引进的母种要做好长期保藏。对母种第一代繁殖尽量多些,暂存4~5℃低温处,取其中一支再移植一批斜面菌种为第二代用于生产。第二代用完后,再取一支第一代母种移植一批使用。一般一支斜而菌种可转移50支,一支母种繁殖3代后,再接原种,这样做能使每批生产所用菌种都保持前几代的水平,有利于菌种优良性状的保持。

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